Для диагностики:
выявления инсулиномы, дефицита конвертазы РС 1/3, мутации проинсулина;
диабета первого и второго типа.
Наименование метода
ИФА
Тип биоматериала/Тип пробирки/Цвет крышки
1) Тип биоматериала: СЫВОРОТКА КРОВИ Тип пробирки, цвет крышки: Желтая доп.
Необходимый объем биоматериала
200 мкл.
Преаналитические требования
Подготовка к исследованию:
За 10 – 14 дней до исследования прекратить прием мочегонных, антигипертензивных препаратов, стероидов, пероральных контрацептивов и эстрогенов. Исключить прием ингибиторов ренина в течение 7 дней до анализа (по согласованию с лечащим врачом). Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение за 72 часа перед сдачей крови. За 12 часов до исследования запрещается прием пищи и любых напитков, за исключением негазированной воды. Не курить в течение 3 часов до проведения исследования.
Кровь берется натощак, с 8 до 11 часов утра, в вакуумную пробирку с разделительным гелем (желтая крышка), строго до метки, указанной на этикетке пробирки. После взятия крови в вакуумные пробирки с гелем, ее следует перемешать путем переворачивания 5 - 6 раз. Пробирку промаркировать: Ф.И.О. пациента, номер образца, кодовый номер учреждения-заказчика (данные должны соответствовать данным, указанным в направительном бланке). После взятия крови пробирку с гелем для получения сыворотки (с желтой крышкой) необходимо оставить на столе на 20 – 30 минут, после чего отцентрифугировать.
Условия хранения и транспортировки:
До приезда курьера пробирку хранить в штативе в вертикальном положении при температуре +2ºС...+8ºС. Доставка в лабораторию осуществляется в день взятия биоматериала.
Примечание:
Во избежание постановки ложного диагноза результаты анализов на проинсулин у пациентов, страдающих гипогликемией, должны интерпретироваться с учетом клинической картины, концентрации глюкозы в крови и результатов других тестов (на инсулин, С-пептид).
Проинсулин является предшественником инсулина и С-пептида, который синтезируется островками В-клеток поджелудочной железы. Образованный островками В-клеток поджелудочной железы, проинсулин заключен в секреторные гранулы, в которых он преобразуется прогормонами конвертазами (РС1/3 и РС2) и карбоксипептидазой Е в С-пептид либо в инсулин. Лишь от 1% до 3% проинсулина в организме остается в несвязанном состоянии. Однако, поскольку период полураспада проинсулина дольше, чем у инсулина, концентрация проинсулина в крови составляет от 10% до 30% от концентрации циркулирующего в крови инсулина. Это количество увеличивается после принятия пищи, а также у пациентов с резистентностью к инсулину на начальной стадии развития диабета второго типа. Проинсулин способен связываться с инсулиновыми рецепторами и проявлять 5 – 10% метаболической активности инсулина.
Интерпретация результатов
Повышенные значения:
более чем у 80% пациентов, страдающих инсулиномой, содержание проинсулина выше нормы;
чувствительность и специфичность диагностики инсулиномы с помощью данного теста составляет 75 – 95%. При дефиците конвертазы РС1/3 уровень инсулина очень низкий, а проинсулина – значительно повышенный, особенно после приема пищи. При этом наблюдается множество гормональных отклонений, включая дефицит кортизола (из-за того что проопиомеланокортин не преобразуется в адренокортикотропный гормон), бесплодие, ожирение.
Пониженные значения:
нехватка проинсулина иногда может быть следствием инсулинзависимого сахарного диабета.
Срок выполнения
Количество дней: 10
Центрифугирование
При ОЦС (относительная центробежная сила) 1500 – 2000 g в течение 10 мин., не ранее 30 мин. и не позднее 60 мин. после взятия крови. Пробирки с гелем нельзя центрифугировать повторно, во избежание гемолиза пробы.